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如何才能獲得單克隆抗體 它有何

編輯:小小寵 來源:寵搜網(wǎng)
摘要
單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體,即單克隆抗體。

單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體,即單克隆抗體。

小編還為您整理了以下內(nèi)容,可能對您也有幫助:

單克隆抗體是什么

1、單克隆抗體的概念

單克隆抗體,英文名為MonoclonalAntibody(mAb),是指由單一克隆B細(xì)胞株所產(chǎn)生的能夠特異性結(jié)合單一抗原的抗體。與傳統(tǒng)的多克隆抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)在于其結(jié)構(gòu)單一性和特異性強(qiáng)。研究者可以選擇性地制備針對某一特定生物分子的單克隆抗體,進(jìn)而精確監(jiān)測、分離這些分子,以及開發(fā)新的藥物和治療方法。

2、制備單克隆抗體的方法

制備單克隆抗體的方法通常包括以下幾個步驟:首先,通過免疫動物(如鼠、兔)注射目標(biāo)抗原,激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生多種抗體。其次,將淋巴細(xì)胞從免疫動物的脾臟或淋巴結(jié)中分離出來,融合到一種稱為骨髓瘤細(xì)胞的惡性細(xì)胞上,生成“雜交瘤(hybridoma)”細(xì)胞株。這些細(xì)胞株同時(shí)具有淋巴細(xì)胞的能夠產(chǎn)生抗體的特性和骨髓瘤細(xì)胞的細(xì)胞能力和生存能力。接下來,通過對細(xì)胞株進(jìn)行篩選,篩選出針對特定抗原、具有單一抗體種類的細(xì)胞株。最后,從單一細(xì)胞株培養(yǎng)出大量同種類的單克隆抗體,用于科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)治療。

3、單克隆抗體的應(yīng)用領(lǐng)域

隨著單克隆抗體技術(shù)的不斷發(fā)展,其應(yīng)用領(lǐng)域也越來越廣泛。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,單克隆抗體被廣泛應(yīng)用于生物制藥、診斷和治療等方面。例如,通過制備針對癌癥細(xì)胞表面標(biāo)志物的單克隆抗體,可以實(shí)現(xiàn)對癌癥細(xì)胞的精準(zhǔn)診斷和治療。此外,單克隆抗體還可以用于治療某些自身免疫性疾病、病毒和細(xì)菌感染等方面。

在科學(xué)研究領(lǐng)域,單克隆抗體也廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、分子生物學(xué)等方面。例如,可以利用單克隆抗體分離或檢測特定的分子,幫助研究者深入理解生命現(xiàn)象,揭示疾病的發(fā)生機(jī)制。

4、單克隆抗體的發(fā)展前景

單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展前景十分廣闊。一方面,隨著基因工程和生物技術(shù)的不斷發(fā)展,單克隆抗體生產(chǎn)過程的成本將進(jìn)一步降低,制備工藝也將更加成熟。另一方面,單克隆抗體技術(shù)的可塑性和多樣性也將不斷增強(qiáng),可以通過對單克隆抗體的修飾和組合,獲得新的特殊功能,并開拓新的應(yīng)用領(lǐng)域。

單克隆抗體的制備步驟

1、免疫動物的選擇:

免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的過程。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。

2、細(xì)胞融合:

采用二氧化碳?xì)怏w處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。

3、選擇性培養(yǎng):

選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。

4、雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化:

在HAT培養(yǎng)基中生長的雜交瘤細(xì)胞,只有少數(shù)是分泌預(yù)定特異性單克隆抗體的細(xì)胞,因此,必須進(jìn)行篩選和克隆化。通常采用有限稀釋法進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。

5、單克隆抗體的大量制備:

單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。

擴(kuò)展資料:

單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):

1、雜交瘤可以在體外“永久”地存活并傳代,只要不發(fā)生細(xì)胞株的基因突變,就可以不斷地生產(chǎn)高特異性、高均一性的抗體。

2、可以用相對不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。

3、由于可能得到“無限量”的均一性抗體,所以適用于以標(biāo)記抗體為特點(diǎn)的免疫學(xué)分析方法。

4、由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能,可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療。

參考資料來源:百度百科-單克隆抗體

單克隆抗體是什么

單克隆抗體

monoclonal antibody

單一克隆產(chǎn)生的并針對單一抗原決定簇的均一性抗體 。它見于免疫 增生性疾病,也可通過雜交瘤技術(shù)人工產(chǎn)生。細(xì)胞雜交是20世紀(jì)60年代建立起來的一種新技術(shù),把種內(nèi)或種間細(xì)胞融合后,可成為新的細(xì)胞。這種含有雙親細(xì)胞核的細(xì)胞經(jīng)有絲為兩個單核子細(xì)胞,子細(xì)胞核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體。1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在細(xì)胞雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上,創(chuàng)立雜交瘤技術(shù), 他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)抗原免疫后的純系小鼠脾細(xì)胞融合,成為雜交細(xì)胞系,既具有瘤細(xì)胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細(xì)胞的合成和分泌特異性抗體的特點(diǎn)。將這種雜交瘤作單個細(xì)胞培養(yǎng),可形成單細(xì)胞系,即單克隆。利用培養(yǎng)或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高滴度的、非常均一的抗體,其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養(yǎng)過程中,只要沒有變異 ,不同時(shí)間所分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)與機(jī)能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。

這項(xiàng)新技術(shù)從根本上解決了在抗備中長期存在的特異性和可重復(fù)性問題。單克隆抗體可直接用于人類疾病的診斷、預(yù)防、治療以及免疫機(jī)制的研究,為人類惡性腫瘤的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊前景。

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